Anticorps contre les nucléoprotéines peut être déterminé à l’aide de réactions immunologiques.

1. Testez pour détecter les cellules LE. En 1948, Hargraves et coll. en frottis moelle Et sang périphérique Chez les patients atteints de LED, lors de l'incubation à 37°C, des leucocytes comportant des inclusions spéciales ont été découverts, appelés cellules LE. Haserick et coll. ont montré que des cellules similaires apparaissent dans les cas où les leucocytes d'individus sains sont incubés avec du sérum ou du plasma de patients atteints de LED. Le test des cellules LE est positif dans 75 % des cas. Ils sont particulièrement souvent identifiés dans la période aiguë. Les cellules LE ne sont pas spécifiques du LED, mais elles se reproduisent plus souvent test positif avec des études répétées, plus la probabilité de ce diagnostic est élevée.

Dans un faible pourcentage de cas, ce phénomène se retrouve également dans d'autres maladies accompagnées de production d'ANF. Ces derniers appartiennent à la classe des anticorps IgG. Selon la plupart des auteurs, l'antigène responsable est la structure des nucléoprotéines ; d'autres chercheurs attachent une importance particulière aux anticorps dirigés contre l'ADN.

Il y a deux phases dans le phénomène LE :

A) immunologique. Dommages cellulaires avec déformation (gonflement) du noyau et perte de chromatine, basophilie, qui sert de condition préalable à la manifestation de l'activité des anticorps. S'ensuit la fixation d'anticorps sur le noyau, qui est masquée en raison de la charge négative des acides nucléiques ;

B) non spécifique. La matière nucléaire sous la forme d'une masse grisâtre-fumée est phagocytée par des cellules typiques du lupus érythémateux. Le complément a une certaine importance tant sous l'influence des anticorps que lors de la phagocytose. Le phénomène LE est une conséquence à la fois de la réponse en anticorps et de la phagocytose du matériel opsonisé provenant des noyaux cellulaires. Les phagocytes sont principalement des neutrophiles polymorphonucléaires et, plus rarement, des granulocytes éosinophiles et basophiles. Les particules dites libres ont des formes variées. Ils peuvent être colorés de manière homogène ou inhomogène. Dans certains cas, il s’agit de noyaux altérés non phagocytés, et dans d’autres, de structures nucléaires déjà phagocytées et émergeant de phagocytes détruits. De grandes structures colorées à l'hématoxyline résultent de la floculation. La même chose se produit dans les tissus.

In vivo, les cellules LE sont présentes dans le sang périphérique, non ricardique et épanchements pleuraux, ainsi que dans le domaine des lésions cutanées.

Le test de cellule LE présente les modifications suivantes :

Test direct utilisant des échantillons de sang et de moelle osseuse du patient ;

Test indirect utilisant les leucocytes du donneur comme substrat pour analyser le sérum du patient et évaluer la phagocytose.

En pratique, une version directe du test est généralement utilisée. La méthode Rebuck est également informative.

2. Réaction de rosette. Les rosettes observées sont constituées de particules LE rondes ou de forme irrégulière entourées de granulocytes polymorphonucléaires. Probablement, structures centrales représentent une étape intermédiaire entre les « corps lâches » et les cellules LE.

3. Les « cellules B » selon Heller et Zimmermann ressemblent aux cellules LE typiques, mais les inclusions sont moins homogènes, donc les différences de couleur entre les inclusions et les noyaux des cellules phagocytaires sont faiblement exprimées.

4. Nucléophagocytose, c'est-à-dire détection de la phagocytose des noyaux sans modifications typiques de leurs structures, qui n'a aucune valeur diagnostique pour le LED.

5. Autres méthodes de détection des anticorps dirigés contre les nucléoprotéines : RSC, immunofluorescence Friou, ainsi que agglutination de particules porteuses conjuguées aux nucléoprotéines. En général, il existe une nette corrélation avec le test des cellules LE.

La configuration des nucléoprotéines agissant comme antigènes est encore inconnue. Tan et al., en utilisant un tampon phosphate, ont extrait la fraction soluble de nucléoprotéine des cellules du thymus de veau. Cet antigène a réagi avec les anticorps dirigés contre les nucléoprotéines des patients atteints de LED, ainsi que de certains patients atteints de PR. Après traitement du médicament avec de la trypsine et de la désoxyribonucléase, l'antigénicité a été perdue. Les auteurs suggèrent que les histones et l'ADN sont impliqués dans la formation de déterminants antigéniques. la plupart de les anticorps anti-nucléoprotéines réagissent avec les nucléoprotéines insolubles et donnent une fluorescence homogène. Les anticorps dirigés contre la fraction soluble des nucléoprotéines se caractérisent par une coloration (liaison) principalement périphérique, qui est également caractéristique des anticorps dirigés contre l'ADN. Les sérums anti-ADN contiennent principalement des anticorps dirigés contre les nucléoprotéines.

Anticorps contre l'ADN. Comme l'a montré l'analyse des données expérimentales, l'ADN natif est un antigène plutôt faible. En utilisant de l'ADN dénaturé et un adjuvant, il est possible d'induire la production d'anticorps. Ceci explique pourquoi les anticorps anti-ADN étudiés dans le LED réagissent en partie avec l'ADN dénaturé, en partie avec l'ADN natif, et parfois avec les deux. Ces derniers sont hétérogènes. Les sites de liaison à l'antigène comprennent une séquence de cinq bases (parmi lesquelles la guanosine joue un rôle particulier) et sont évidemment situés dans différentes zones de la macromolécule. L'adénosine et la thymidine revêtent probablement une importance particulière. Les anticorps dirigés contre l'ADN dénaturé réagissent souvent avec l'ARN dénaturé.

Les anticorps anti-ADN méritent une attention particulière, car ils sont hautement spécifiques du LED. Pour décider s'ils sont dirigés contre l'ADN natif ou dénaturé, une réaction d'agglutination passive est utilisée (l'antigène est pré-conjugué à un support : latex ou érythrocytes). Il s'agit d'une méthode assez sensible, donnant un résultat positif dans 50 à 75 % des cas. En utilisant une précipitation directe dans un gel d'agar, des résultats positifs ne sont obtenus que dans 6 à 10 % des cas, et avec immunoélectrophorèse - dans 35 à 80 % des cas. Il existe des preuves de la production d'anticorps contre l'ADN natif. importance pratique, car ce phénomène est très spécifique au LED. A cet effet, le RIM ou l'immunofluorescence est utilisé. Le premier test utilise de l'ADN marqué. Après l'ajout de sérum contenant de l'Ab, la séparation de l'ADN libre et lié se produit, généralement par précipitation au sulfate d'ammonium ou au polyéthylène glycol, filtration à travers des filtres millipores (cellulose) ou en utilisant la technique des doubles anticorps. Cette dernière méthode est plus spécifique, car elle élimine l'influence de la liaison non spécifique de la protéine principale sur l'ADN. La capacité à lier les sérums des patients atteints de LED peut être 30 à 50 fois supérieure à celle des individus en bonne santé. Les facteurs critiques sont différents masse moléculaire ADN, ainsi que les impuretés d'ADN dénaturé et d'autres protéines. En pratique, la technique de la « phase solide » est souvent utilisée : l’ADN est fixé à la surface du plastique ou de la cellulose. Lors de la deuxième étape, une incubation avec le sérum à tester est réalisée. Pour lier les anticorps, des anti-Ig marqués sont utilisés. L’origine de l’ADN ne joue pas un rôle significatif dans ces réactions. Lorsque les complexes antigène-anticorps sont séparés, une certaine dénaturation se produit toujours. Les méthodes classiques de purification ne garantissent pas l’élimination complète de cet ADN. L'ADN des bactériophages est beaucoup plus stable. La technique ELISA peut être utilisée de manière similaire.

Grâce à l'utilisation de trypanosomes ou Crithidia luciliae, il est possible de détecter des anticorps dirigés contre l'ADN par immunofluorescence. Chez ces flagellés, l’ADN est localisé dans des mitochondries géantes. Avec une manipulation et une application appropriées méthode indirecte L'immunofluorescence ne peut détecter que les anticorps ADN. La sensibilité de ce test est légèrement inférieure à celle du RIM. En utilisant du sérum anti-C3 marqué à l'isothiocyanate de fluorescéine, des anticorps liés à l'ADN liés au C peuvent être détectés, ce qui est évidemment utile pour déterminer l'activité du processus.

Les anticorps contre l'ADN natif ont une valeur diagnostique presque uniquement dans le LED (dans la période aiguë dans 80 à 98 %, en rémission - 30 à 70 %) ; on les retrouve seulement parfois dans certaines formes d'uvéite. Dans d’autres maladies, la question est débattue de savoir s’il s’agit spécifiquement d’anticorps dirigés contre l’ADN natif. Un titre élevé n'est pas toujours associé à activité prononcée processus. Un changement simultané de la concentration du complément suggère des lésions rénales. Les anticorps IgG jouent probablement un rôle pathogénétique plus important que les IgM. Un seul test positif pour la détection des anticorps anti-ADN permet de poser un diagnostic, mais pas une conclusion pronostique, et seulement un maintien sur une longue période. niveau supérieur ces anticorps peuvent être considérés comme pronostiques signe défavorable. Une diminution du niveau prédit une rémission ou (parfois) la mort. Certains auteurs notent une corrélation plus prononcée entre l'activité du processus et la teneur en anticorps fixateurs du complément.

Lors de l'immunofluorescence, les anticorps dirigés contre l'ADN sont détectés principalement le long de la périphérie du noyau, mais ils sont parfois distribués dans d'autres zones sous la forme d'un maillage délicat. En utilisant des méthodes assez sensibles, il est possible de détecter de l'ADN dans le sérum à une concentration allant jusqu'à 250 mg/l.

Anticorps contre l'ARN, ou anticorps antiribosomiques, sont présents chez 40 à 80 % des patients atteints de LED. Leur titre ne dépend pas du niveau d'anticorps dirigés contre l'ADN et du degré d'activité du processus. Beaucoup moins fréquemment, des anticorps anti-ARN sont détectés dans la myasthénie grave, la sclérodermie, la polyarthrite rhumatoïde, y compris le syndrome de Gougerot-Sjögren, ainsi que chez les proches du patient et chez les individus en bonne santé. Ils réagissent avec l’ARN natif et synthétique. Dans d'autres maladies, ils ne surviennent presque jamais. Dans le syndrome de Sharp, des anticorps dirigés principalement contre la RNP sont détectés. Les anticorps dans le LED sont relativement hétérogènes et réagissent principalement avec les bases uridine, et dans la sclérodermie - avec les bases uracile de l'ARN. Des anticorps contre l'acide polyriboadénylique synthétique sont trouvés chez 75 % des patients atteints de LED, 65 % des patients atteints de lupus discoïde et 0 à 7 % des patients atteints d'autres maladies du tissu conjonctif. Des anticorps sont souvent détectés chez les proches des patients atteints de LED (principalement IgM). Les anticorps ribosomiques réagissent dans certains cas avec l'ARN libre du ribosome.

Anticorps contre l'histone. Les histones sont un mélange de protéines de faible poids moléculaire qui se lient à l'ADN via leurs structures de base. Les antihistone Abs sont détectés dans le lupus (principalement d'origine médicamenteuse) et la PR. Ils présentent des spécificités quelque peu différentes. Ainsi, dans le LED, ces anticorps sont dirigés principalement contre HI, H2B et H3. Ils sont détectés chez 30 à 60 %, et à faibles titres même chez 80 % des patients. Les anticorps anti-H2B sont associés à la photosensibilité. Dans le lupus induit par le prokainamide, les ANF détectés sont principalement dirigés contre les histones. Dans les manifestations cliniques, il s'agit principalement d'anticorps IgG dirigés contre le complexe H2A-H2B ; dans des conditions asymptomatiques, il s'agit d'anticorps IgM, dont la spécificité vis-à-vis d'une certaine classe d'histones ne peut être reconnue. Le titre le plus élevé d'anticorps antihistone a été décrit dans la vascularite rhumatoïde (cela n'est qu'en partie dû à des réactions croisées dans le RF). Des méthodes très sensibles, telles que l'immunofluorescence, RIM, ELISA, immunoblot, permettent une analyse utilisant les histones les plus purifiées. Les anticorps dirigés contre les histones ne sont pas spécifiques d’une espèce ou d’un tissu.

Anticorps contre les protéines non histones- aux antigènes nucléaires extractibles. L'antigène responsable est hétérogène. Ses principaux fragments sont les antigènes Sm et RNP. Il existe probablement d’autres fractions, comme en témoignent les données d’immunoélectrophorèse utilisant des extraits de thymus de lapin et de veau.

L'immunofluorescence démontre le motif de la tache. La localisation des anticorps est assez difficile à établir. L'ensemble des anticorps dirigés contre les protéines non histones peut être déterminé par le test d'agglutination passive et le RSK. Des résultats positifs ont été obtenus pour le LED dans 40 à 60 %, pour la polyarthrite rhumatoïde - dans 15,5 % et pour d'autres maladies du tissu conjonctif - dans 1 % des cas. Le syndrome de Sharpe occupe une place particulière.

L'antigène est extrait de la fraction nucléaire cellulaire à l'aide d'un tampon phosphate. Il est stable aux ribo- et désoxyribonucléases, à la trypsine, à l'éther et au chauffage jusqu'à 56 °C. Chimiquement, c'est une glycoprotéine. Dans le LED, les anticorps contre l'antigène Sm sont détectés dans près de 30 % des cas par précipitation dans le gel et agglutination passive, et vice versa : lorsque ces anticorps ont été détectés, 85 % des sujets présentaient un lupus érythémateux disséminé.

Les anticorps Sm précipitent cinq petits ARN (U1, U, U4-U6). Les anticorps RNP reconnaissent la séquence nucléotidique 5s ainsi qu'une structure polypeptidique spécifique. En fait, l’épissage peut être bloqué à l’aide d’anticorps, mais il n’existe toujours aucune donnée indiquant un rôle pathogénétique de ces mécanismes. Selon de nouvelles recherches, les sites de liaison de deux types d’anticorps sont situés sur la même molécule, avec des épitopes différents. Sm-Ar peut également être présent sous forme libre. Les anticorps Sm se lient à une séquence nucléotidique proche de la structure protéique.

Anticorps contre les antigènes centromères dirigé contre les kinétostructures du centromère. L'antigène est détecté en métaphase. Pour sa détection, les lignées cellulaires à division rapide sont les plus appropriées, par exemple la lignée HEp-2 obtenue à partir de cellules de carcinome laryngé en culture.

Complexe RM-1. Apparemment, il s’agit d’un antigène hétérogène sensible à la chaleur et au traitement à la trypsine. Noté contenu élevé dans le thymus des veaux, en particulier également dans les nucléoles. Les anticorps dirigés contre cet antigène sont retrouvés dans l'association polymyosite et sclérodermie dans 12 % des cas, avec polymyosite dans 9 % et sclérodermie dans 8 % des cas. Parfois, les anticorps PM-1 sont le seul type d’auto-anticorps détecté et présentent donc une valeur diagnostique particulière. Des niveaux élevés de ces anticorps précédemment signalés étaient dus à la présence d’impuretés.

PCNA. Les anticorps dirigés contre cet antigène ont été détectés par immunofluorescence polymorphe à l'aide d'une lignée cellulaire.

Mi-système. Comme l'ont montré des études relativement nouvelles, les IgG fonctionnent comme un antigène, mais sous une forme légèrement modifiée, mais une tentative d'identification d'anticorps utilisant le facteur rhumatoïde dans les réactions a échoué. Question sur valeur diagnostique les anticorps peuvent être considérés comme intenables.

Anticorps contre les nucléoleségalement détecté dans le LED (environ 25 % des cas), mais beaucoup plus souvent (plus de 50 %) et à titre élevé dans la forme généralisée de sclérodermie, en outre, chez près de 8 % des patients atteints de polyarthrite rhumatoïde.

Pour le tarif système immunitaire Chez les patients atteints de LED, il est conseillé de déterminer le niveau d'anticorps dirigés contre l'ADN et l'activité du complément. Extrêmement niveau faible ce dernier, avec un titre assez élevé d'anticorps fixateurs du complément contre l'ADN, indique une phase active de la maladie avec implication des reins dans le processus. Une diminution du titre du complément précède souvent crise clinique. Avec activité réactions immunitaires dans le LED, le niveau d'anticorps IgG (contre l'ADN et l'ARN) est particulièrement corrélé.

Le traitement par corticoïdes et immunosuppresseurs conduit souvent à déclin rapide Capacités de liaison à l’ADN, qui ne s’expliquent pas seulement par une diminution de la production d’anticorps. À formes posologiques, notamment lors d'un traitement par l'hydralazine, des anticorps dirigés contre l'ADN sont parfois détectés.

Dans la PR, des formes de la maladie de type LED sont souvent identifiées, dans lesquelles des cellules LE sont détectées. Conformément à cela, une immunofluorescence est observée et les anticorps dirigés contre les nucléoprotéines sont déterminés. DANS cas exceptionnels des anticorps anti-ADN sont détectés, une combinaison de deux maladies est alors possible. Les ANF dans la polyarthrite rhumatoïde appartiennent le plus souvent aux immunoglobulines de classe M.

Dans la sclérodermie, les ANF sont également assez souvent détectés (60 à 80 %), mais leur titre est généralement inférieur à celui de la PR. La répartition des classes d'immunoglobulines correspond à celle du LED. Dans 2/3 des cas, la fluorescence est inégale, dans 1/3 - homogène. La fluorescence des nucléoles est assez caractéristique. Dans la moitié des observations, les anticorps se lient au complément. Il convient de noter un certain écart entre les résultats positifs de la détermination générale de l'ANF et l'absence ou la production d'anticorps à faible titre dirigés contre les nucléoprotéines et l'ADN. Cela montre que les ANF sont principalement dirigés contre les substances qui ne contiennent pas de chromatine. Il n’existe aucune relation entre la présence d’ANF et la durée ou la gravité de la maladie. Le plus souvent, des corrélations sont trouvées chez les patients dont le sérum contient également du facteur rhumatoïde.

Sauf maladies rhumatismales, l'ANF se retrouve dans les cas chroniques hépatite active(30-50% des observations). Leur titre atteint parfois 1 :1000. Selon divers auteurs, dans le lupus érythémateux discoïde, l'ANF est détecté chez au maximum 50 % des patients.

L'immunofluorescence est une méthode de dépistage presque idéale. Lorsque le titre Ab est inférieur à 1:50, il est peu informatif (surtout chez les personnes âgées). Des titres supérieurs à 1 : 1 000 ne sont observés que dans le LED, l'hépatite lupoïde et parfois dans la sclérodermie. Les anticorps dirigés contre les nucléoprotéines sont le plus souvent détectés (94 %). Un test informatif est la détection d'anticorps contre l'ADN.

Le lupus érythémateux systémique (LED) est l'une des maladies systémiques auto-immunes chroniques (non spécifiques à un organe) les plus courantes, caractérisée par des lésions diffuses du tissu conjonctif et des vaisseaux sanguins ; appartient au groupe des collagénoses dites majeures.

L'incidence du LED varie selon les pays ; par exemple, en Amérique du Nord et en Europe, il y a en moyenne 40 cas pour 100 000 habitants. Cependant, il a été établi que la population noire d’Amérique et la population espagnole sont plus souvent touchées et que leur maladie est plus grave.

Les femmes souffrent beaucoup plus souvent de LED (9 : 1) ; jusqu'à 80 % des femmes souffrent de LED pendant leurs années de procréation. Chez les enfants et les personnes âgées, l'incidence du LED est d'environ 1 cas pour 100 000 habitants, avec un ratio femmes/hommes de 3/1.

Très souvent, en plus des signes de cette maladie, les patients atteints de LED présentent également des signes d'une autre pathologie du tissu conjonctif - la polyarthrite rhumatoïde et la sclérodermie.

Immunopathogenèse. Le développement du LED est associé à l'exposition à facteurs génétiques et facteurs environnement, qui conduisent au développement de troubles de la régulation immunitaire, à la modification des autoantigènes, à une rupture de la tolérance et au développement d'une réponse auto-immune.

Le rôle des facteurs génétiques est confirmé par les données suivantes :

• Il a été prouvé que le LED se développe chez 30 % des jumeaux monozygotes et seulement 5 % des jumeaux dizygotes ;
• Une association a été établie entre la prédisposition au LED et les gènes allotypes HLA DR2/DR3, Gm et les caractéristiques structurelles de la chaîne alpha du récepteur de reconnaissance de l'antigène des lymphocytes T ;
• Il existe des souches consanguines spéciales de souris dans lesquelles une maladie de type LED se développe spontanément ;
• Il a été révélé que la prédisposition à Maladie du LED codé par plus de 6 gènes situés sur des chromosomes différents.

Le rôle des facteurs environnementaux est confirmé par les données suivantes :

• 30 % des patients présentent une photosensibilité de la peau, qui se manifeste par l'apparition d'une éruption cutanée après exposition au soleil ;
• Il a été établi que sous l'influence de l'hydralazine, de la procaïnamide, de la phénytoïne, de l'hydantoïne, de l'isoniazide, de la chlorpromazine, de la D-pénicilline amine, etc., un syndrome de LED d'origine médicamenteuse se développe ;
• Les cas d'induction du LES après des infections sont bien connus.

Le rôle des facteurs hormonaux est confirmé par l'incidence plus élevée du LED chez les femmes que chez les hommes (rapport 9 : 1).

Le rôle des autoanticorps, des complexes immuns et du déficit en complément est étayé par les données suivantes :

• Une augmentation de la concentration d'IgG dans le sérum sanguin des patients ;
• La présence d'auto-anticorps contre des antigènes autologues et étrangers ;
• Détection des complexes immuns circulants chez 80 % des patients ;
• Une diminution de la concentration de C2, C4 et C3 dans le sérum sanguin des patients ;
• Une diminution du nombre de récepteurs du complément (CR1) sur les globules rouges ;
• Dépôt d'IgG, M, C3 et C4 dans les capillaires des glomérules rénaux et de la peau.

Troubles des lymphocytes T et B chez les patients atteints de lymphocytes T LED :

• Lymphopénie, se développant sous l'influence d'anticorps antilymphocytes, y compris les anticorps anti-T ;
• Diminution du nombre et de la fonction des cellules suppressives ;
• Diminution du nombre de lymphocytes T « naïfs » (CD4V8 CD45RA+) ;
• Diminution du nombre de cellules T mémoire (CD4\8 CD29. CD45RO+) ;
• Augmentation du nombre de lymphocytes T activés (CD4+DR+).

Lymphocytes B :

• Activation polyclonale des lymphocytes B ;
• Sensibilité accrue à la stimulation des signaux de cytokines ;
• Le profil anormal des cytokines chez les patients atteints de LED comprend une diminution de la capacité des monocytes à produire de l'IL-1, ainsi qu'une diminution de la capacité des lymphocytes T à répondre à l'IL-2.

Lorsque la maladie est activée, on constate également une augmentation du taux de cytokines qui contrôlent la différenciation des lymphocytes B et la production d'anticorps humoraux : IL-6, IL-4, IL-5. L'un des indicateurs sensibles indiquant l'activation du LED est une augmentation de la quantité de récepteurs solubles de l'IL-2 dans le sérum sanguin.

Complexes immunitaires. Chez les patients avec scène active Il a été prouvé que le LED augmente le niveau de complexes immuns circulants qui, déposés dans les vaisseaux, provoquent une inflammation des tissus.

Dans des conditions physiologiques, les anticorps produits en réponse à infection microbienne, forme circulant complexes immuns. Ces derniers, après liaison au complément sérique, se fixent sur les érythrocytes du fait de la présence d'un récepteur du C3b sur la membrane érythrocytaire. Par la suite, les complexes immuns pénètrent dans le foie et la rate, où ils sont éliminés du sang.

Dans le LED, en raison de divers troubles, des conditions sont créées pour la persistance de complexes immuns circulants (CIC) à des titres élevés. Cela conduit au fait que les complexes immuns se déposent dans les tissus non lymphoïdes, par exemple dans les glomérules du rein ou dans les vaisseaux de la peau. Leur dépôt dans les tissus entraîne l'activation du complément, la chimiotaxie des leucocytes polymorphonucléaires, qui libèrent des médiateurs inflammatoires, ce qui provoque des lésions vasculaires et le développement d'une vascularite.

Ainsi, les principales manifestations cliniques du LED s’expliquent par les mécanismes immunitaires suivants :

• La présence de CEC, qui comprennent des anticorps antinucléaires ; ces dernières, déposées dans la microvascularisation, conduisent au développement de vasculopathies et, par conséquent, à des lésions tissulaires.
• La présence d'auto-anticorps dirigés contre les cellules sanguines entraîne une leuco-, une lympho-, une thrombopénie et une anémie.
• La présence d'anticorps antiphospholipides conduit au développement du syndrome dit des antiphospholipides.

Clinique. Le plus commun premières manifestations Le LED est une polyarthrite et une dermatite. Veuillez noter que ; 1) en principe, n'importe lequel des symptômes du LED peut être la première manifestation de la maladie ; 2) cela peut prendre plusieurs mois, voire plusieurs années, avant son installation diagnostic final SCV. En plus de la polyarthrite et de la dermatite mentionnées, les premiers symptômes du LED auxquels vous devez prêter attention comprennent la fatigue chronique, divers troubles de la conscience, des effets tels que l'anxiété et la dépression, la péricardite, la thrombocytopénie, l'anémie, la leucopénie et la lymphopénie. Par la suite, des signes de lésions des reins et du système nerveux central apparaissent.

Diagnostic. Les critères de diagnostic du LED et d'autres maladies du tissu conjonctif ont été élaborés par l'American Rheumatological Association et comprennent 11 points. Pour une meilleure mémorisation, F. Graziano et R. Lemanske (1989) suggèrent d'utiliser un dispositif mnémonique, mettant en évidence les premières lettres de chaque élément de manière à former une nouvelle phrase - SOAP BRAIN MD (SOAP-soap ; CERVEAU-cerveau ; MD - médecin):

• S – sérite, pleurale ou péricardique ;
• 0-ulcérations buccales (ou nasopharyngées) de la muqueuse, identifiables lors de l'examen ;
• A – arthrite, non érosive, impliquant deux articulations ou plus, avec douleur, gonflement et épanchement ;
• P-photosensibilité, conduisant à l'apparition d'une éruption cutanée après exposition au soleil ;
• Sang B : l'anémie hémolytique, leucopénie (< 400 в 1 мл), лимфопения (< 1500 мм3), тромбоцитопения (< 100 000 в 1 мл);
• R – reins (rénaux) : protéinurie (>0,5 g/jour) ou cylindrurie ;
• A – anticorps antinucléaires ;
• I – tests immunitaires : anticorps anti-ADNdb, anticorps anti-Sm, réaction faussement positive à la syphilis, cellules LE ;
• N – troubles neurologiques : convulsions ou une psychose non associée à des médicaments ou à des troubles métaboliques tels que l'urémie, un déséquilibre électrolytique ou une acidocétose ;
• M – éruption cutanée (malaire) avec érythème fixe en forme de papillon dans la région nasogénienne ;
• D – éruption discoïde avec apparition de taches érythémateuses.

Le diagnostic est considéré comme confirmé si 4 critères sur 11 sont remplis.

Diagnostic de laboratoire. Vous trouverez ci-dessous des signes de laboratoire qui peuvent aider à diagnostic de LED, et la fréquence de leur détection chez les patients non traités est indiquée en pourcentage.

Signes de laboratoire de LED

Anticorps contre l'ADNdb > 80 % (ds - double brin) Anticorps antinucléaires (titres élevés ; IgG) - 95 % Augmentation du taux d'IgG dans le sérum sanguin - 65 % Diminution des taux des composants du complément C3 et C4 - 60 % Anticorps antiplaquettaires - 60 % Cryoglobulinémie - 60%

Anticorps contre les antigènes nucléaires extractibles :

Anticorps contre les phospholipides – 30-40%

facteur rhumatoïde (titres faibles) – 30 %

Biopsie cutanée révélant la présence de dépôts d'IgG, C3 et C4 - 75%

Augmentation de l'ESR – 60 %

Leucopénie - 45 %

Anticoagulant lupique – 10-20 %

Réaction de Wasserman faussement positive - 10%

Une augmentation du taux de protéine C-réactive, normale avant l'infection (un test informatif pour identifier une infection)

Protéinurie – 30 %

Selon N. Chapel, M. Haeney (1995), la détermination des cellules LE est une méthode non spécifique, très peu sensible et dépassée.

Lors d'un examen de laboratoire du patient, divers examens hématologiques, sérologiques et troubles biochimiques, qui sont une conséquence directe de la maladie, sont causées par ses complications ou sont secondaires et associées au traitement.

De nombreux tests (par exemple, taux d'immunoglobulines, taux de composants du complément, présence d'auto-anticorps) ne fournissent pas à eux seuls un diagnostic et doivent être interprétés dans le contexte individuel. image clinique.

L'un des signes immunologiques caractéristiques en laboratoire du LED est la présence dans le sang circulant d'auto-anticorps dirigés contre divers composants de la cellule : structures nucléaires, membranaires, protéines sériques. Il a été prouvé que ces autoanticorps déterminent en grande partie les caractéristiques cliniques de la manifestation du LED. Leur participation à la pathogenèse du LES peut être associée soit à un effet dommageable direct sur la cellule, soit à l'induction d'une dérégulation immunitaire, qui, à son tour, conduit au développement de la maladie.

Les autoanticorps antinucléaires (ou antinucléaires) réagissent avec les antigènes nucléaires et sont retrouvés chez plus de 95 % des patients. Ils sont mieux détectés en utilisant la méthode d'immunofluorescence indirecte. Utilisé comme substrat diverses cellules, par exemple, la lignée cellulaire continue HEp2, etc. Lors de la détermination des autoanticorps antinucléaires par cette méthode, le moment le plus crucial est d'établir la nature de la lueur fluorescente. Il existe trois principaux types de lueur : homogène, annulaire (en forme de rebord) et granuleuse (mouchetée).

La luminescence homogène est provoquée par des auto-anticorps dirigés contre le dsDNK, les histones et les désoxyribonucléoprotéines. La luminescence granulaire est causée par des autoanticorps dirigés contre des antigènes nucléaires extraits - Sm, UT-RNP, Scl 70 (ADN topoisomérase 1), SS-A/Ro, SS-B/La, etc. La luminescence en forme d'anneau se trouve en petit nombre des patients atteints d'hépatite compliquée de LED, de cytopénie, de vascularite. Bien que la méthode d’immunofluorescence indirecte soit très sensible, sa spécificité est faible et est donc principalement utilisée comme méthode de dépistage.

Les auto-anticorps dirigés contre l'ADN sont plus fréquents chez les patients atteints de LED. Il existe des auto-anticorps dirigés contre l'ADN natif (double brin - ds) et l'ADN simple brin (ss). Les méthodes suivantes sont actuellement utilisées pour les identifier : dosage radioimmunologique, ELISE et immunofluorescence. Les auto-anticorps dirigés contre l’ADN-SS se trouvent dans diverses maladies inflammatoires et auto-immunes, leur détection a donc peu de valeur diagnostique. En revanche, des titres élevés d’autoanticorps d’ADNdb sont hautement spécifiques (98 %) du LED et reflètent souvent l’activité de la maladie. Cependant, on les retrouve chez seulement 60 % des patients atteints de LED. les auto-anticorps dirigés contre l'ADNdb jouent un rôle pathogène dans le développement du LES, et leur présence est souvent associée à une atteinte rénale précoce dans processus pathologique. Leur détermination est très utile pour surveiller l'activité de la maladie et l'efficacité du traitement.

Autoanticorps contre les structures non histones.

1. autoanticorps contre l'antigène Sm (Smith) et les antigènes ribon-cléoprotéine. Le terme « antigènes nucléaires extractibles » (ENA) comprend deux antigènes : le Sm et la ribonucléoprotéine nucléaire (nRNP). Ces antigènes sont composés de cinq uridylates différents, enrichis en ribonucléoprotéines associées à des protéines. Ils forment une unité fonctionnelle, le spliceosome, impliqué dans la modification post-traductionnelle de l'ADNm. Les patients atteints de LED développent des auto-anticorps spécifiques contre ces unités fonctionnelles. les autoanticorps dirigés contre U1-RNP sont appelés autoanticorps antiUIRNP ; les anticorps dirigés contre le complexe UI-U5RNP sont appelés autoanticorps anti-Sm. Pour identifier ce groupe hétérogène d'auto-anticorps, la méthode d'immunodiffusion (Ouchterlony), l'immunofluorescence quantitative et l'immunoprécipitation sont utilisées. des autoanticorps contre l'UI-RNP et le Sm sont trouvés respectivement chez 40 à 50 % et 10 à 30 % des patients atteints de LED. Les anticorps Ayto-Sm sont très spécifiques du LED. des autoanticorps contre l'UI-RNP sont trouvés chez les patients atteints de LED qui souffrent simultanément du syndrome de Raynaud et de la myosite ou de la sclérodermie et de la polymyosite. En règle générale, chez les patients présentant des auto-anticorps anti-UI-RNP, les anticorps anti-ADNdb ne sont pas détectés, la maladie sous-jacente n'est pas grave et les lésions rénales sont rarement détectées.

2. Autoanticorps contre les antigènes SS-A/Ro et SS-B/La. Une autre partie des petites ribonucléoprotéines nucléaires (SSA/Ro et SSB/La) est associée à l'ARN polymérase III lors de la transcription de l'ARNm. L'antigène SSA/Ro est une protéine (poids moléculaire 6,0-5,2 104 KD) associée à l'une des cinq nucléoprotéines cytoplasmiques ; L'antigène SSB/La (poids moléculaire 4,8-104 KD) a été initialement découvert dans le cytoplasme de patients lupiques atteints du syndrome de Sjögren. L'expression de ces antigènes varie selon le stade du cycle cellulaire, et leur localisation peut se retrouver dans le cytoplasme ou le noyau. La production d'autoanticorps contre les antigènes SSA/Ro et SSB/La est associée à la présence de certains antigènes dans le locus HLA-DQ chez le patient. Les anticorps anti-SS-A/Ro et anti-SS-B/La sont respectivement retrouvés chez 25 à 40 % et 10 % des patients atteints de LED. Les anticorps anti-SS-A/Ro peuvent apparaître sans anticorps anti-SS-B/La, tandis que les anticorps anti-SS-B/La n'apparaissent qu'avec les anticorps anti-SS-A\Ro. Les patients porteurs d'anticorps anti-SS-A\Ro présentent le plus souvent une photosensibilité, des symptômes sévères du syndrome de Sjögren, un facteur rhumatoïde et une hypergammaglobulinémie. Des anticorps anti-SS-A/Ro sont également détectés chez des personnes saines (3 %) et chez des proches de patients atteints de maladies auto-immunes.

La question des titres dans lesquels les anticorps antinucléaires sont détectés est très complexe du point de vue valeur diagnostique. On sait que dans les différents laboratoires, les dilutions des sérums normaux (c'est-à-dire les titres eux-mêmes) auxquelles les anticorps antinucléaires continuent d'être détectés varient considérablement. Par conséquent, vous devez respecter la règle suivante : si les titres d’anticorps dans le sérum sanguin des patients sont moins de 2 fois supérieurs aux titres d’anticorps dans le sérum sanguin d’individus sains (témoins), ces résultats doivent être considérés comme douteux. Par exemple, si dans le sérum d'individus en bonne santé le titre d'anticorps est de 1:16, alors les résultats des tests sur le sérum de patients présentant des titres d'anticorps de 1:32 et même de 1:64 doivent être considérés comme douteux. Plus le titre d’anticorps est élevé, plus leur détermination est informative pour établir un diagnostic. Il convient de garder à l’esprit que chez environ 2 % de la population en bonne santé, ces anticorps peuvent être détectés à de faibles titres.

Le diagnostic de LED est facilement établi si le patient présente 3 ou 4 symptômes typiques, tels qu'une éruption cutanée caractéristique, une thrombocytopénie, une sérite ou une néphrite, des anticorps antinucléaires. Cependant, malheureusement, dans la pratique, nous devons le plus souvent faire face à des plaintes telles que des arthralgies ou des manifestations non spécifiques de l'arthrite, des symptômes vaguement exprimés du système nerveux central, des antécédents de - démangeaison de la peau ou le phénomène de Raynaud et un test d'anticorps antinucléaires faiblement positif. Dans de tels cas, le diagnostic peut être préliminaire et un tel patient doit être sous la surveillance d'un médecin.

L’un des signes immunogénétiques supplémentaires, qui permet dans certains cas de vérifier le diagnostic, est la détermination du phénotype HLA du patient. Il a été établi que la production de certains anticorps chez les patients atteints de LED est associée à certains antigènes HLA. Un assez grand nombre de cas ont été décrits dans lesquels, à la suite de la prise de l'un ou l'autre médicament, des patients ont développé des troubles ressemblant au LED. L’un de ces médicaments classiques est le procaïnamide. Les caractéristiques cliniques caractéristiques de ce syndrome de LED sont une sévérité relativement modérée des symptômes, notamment arthralgie, éruption maculopapuleuse, sérite, fièvre, anémie et leucopénie. les autoanticorps dans cette forme de LED ont certaines fonctionnalités: 1) les anticorps antinucléaires, s'ils sont détectés, donnent une lueur homogène lors des études d'immunofluorescence ; 2) en règle générale, des anticorps antihistones sont détectés ; 3) les anticorps dirigés contre l'ADN natif ne sont jamais détectés dans le LED d'origine médicamenteuse.

Après l'arrêt du médicament suspect, les symptômes disparaissent au bout de 4 à 6 semaines, mais des auto-anticorps continuent d'être détectés pendant encore 6 à 12 mois.

Il convient de mentionner les anticorps antiphospholipides, retrouvés chez environ 30 % des patients atteints de LED. Ils sont à l'origine de divers types de complications thromboemboliques, telles qu'accidents vasculaires cérébraux, thromboses de la veine cave (veine porte), thrombophlébite, embolie pulmonaire à différents niveaux, etc. La présence d'anticorps antiphospholipides chez les patients atteints de LED détermine en grande partie l'issue du maladie. Cependant, le risque de complications thromboemboliques n’est pas le même chez tous les patients porteurs de tels anticorps. Le risque est plus élevé dans les cas où des troubles fonctionnels du système de coagulation sanguine sont détectés simultanément avec des anticorps antiphospholipides. La présence d'anticorps antiphospholipides chez les patients lupiques peut être à l'origine d'une réaction de Wasserman positive. Il s'ensuit que si une réaction de Wasserman positive est détectée sans raison apparente, alors la présence d'anticorps antiphospholipides doit être suspectée comme signe précoce SCV.

La présence d'anticorps antiphospholipides chez les femmes (y compris celles sans LED) peut provoquer des fausses couches à répétition. Par conséquent, si une femme a des antécédents de fausses couches répétées au cours du deuxième trimestre de la grossesse, un test de recherche des anticorps antiphospholipides doit être effectué (pour plus de détails à ce sujet). , voir ci-dessous), rubrique « Immunologie de la reproduction »).

Les patients atteints de LED courent un risque très élevé de développer des complications infectieuses, qui entraînent souvent la mort. Le plus souvent, cela est observé chez les patients présentant des lésions des reins et du système nerveux central, à qui il faut prescrire fortes doses glycocorticoïdes et cytostatiques ; dans ce cas, les complications infectieuses sont dues à une infection opportuniste. Cependant, même chez les patients lupiques plus intacts, la susceptibilité aux infections (par exemple, lésions systémiques causées par Neisseria, Salmonella, coques à Gram positif) est augmentée. La raison en est la leucopénie induite par les anticorps et le dysfonctionnement des granulocytes, la diminution des taux de complément, ce qu'on appelle l'asplénie fonctionnelle, etc.

Traitement. Malheureusement, traitement standardça conviendrait à n'importe qui patient atteint de LED, n'existe pas. Dans chaque cas individuel, en tenant compte du tableau clinique individuel, de la gravité de la maladie et des paramètres de laboratoire, l'une ou l'autre tactique de traitement est déterminée. Parmi les recommandations générales, on peut noter :

• Inclusion d'acides gras insaturés dans l'alimentation ;
• Interdiction de fumer;
• Programme d'exercices réguliers ;
• Maintenir un poids corporel idéal ;
• Utilisation de photoprotecteurs, notamment en évitant l'exposition au soleil en milieu de journée.

Lorsque le LED est détecté, le traitement principal doit viser à résoudre deux problèmes :

• prévention des stimuli antigéniques ou de l'influence de facteurs environnementaux qui pourraient servir de déclencheurs à l'activation de la maladie ;
• contrôle de la production d'auto-anticorps grâce à des effets immunosuppresseurs.

Il ne faut pas oublier que certains médicaments, ainsi que les vaccins, peuvent provoquer une exacerbation de la maladie. Souvent, une exacerbation se développe après des infections, une insolation, un stress et d'autres expositions à des facteurs environnementaux.

Médicaments et méthodes utilisés dans le traitement des patients atteints de LED

• Anti-inflammatoires non stéroïdiens
• Médicaments antipaludiques
• Hydroxychloroquine (Plaquenil)
• Chloroquine
• Corticostéroïdes
• Prednisone ou prednisolone
• Méthylprednisolone (iv/iv)
• Médicaments immunosuppresseurs (immunosuppresseurs)
• Azathioprine
• Cyclosporine A (sandimmune-néorale)
• Agents antitumoraux ayant des effets immunosuppresseurs
• Méthotrexate
• Cyclophosphamide
• Antibiotiques
• Chlorambucil
• Androgènes
• 19-nortestostérone
• Danazol
• Traitements efférents
• Plasmaphérèse, plasmasorption
• Lymphocytophérèse
• Régime
• Analogues de l'acide arachidonique
• Immunothérapie
• Immunoadsorption des anticorps anti-ADN

Immunoglobuline humaine normale pour administration intraveineuse des anticorps monoclonaux contre les cellules CD4+ ou CD5+. Contrôller manifestations cutanées Pour le LED, l’utilisation de corticostéroïdes topiques peut être très efficace. DANS étapes initiales maladies, le traitement de la polyarthralgie et de la polyarthrite est possible à l'aide d'anti-inflammatoires non stéroïdiens. S'ils sont inefficaces, vous devez procéder à la prescription de médicaments antipaludiques. En règle générale, il s'agit de l'hydroxychloroquine (Plaquenil). Ce médicament est moins efficace dans le traitement des manifestations cutanées et articulaires, mais peut en retarder l'apparition. lésions systémiques. La dose initiale est généralement de 400 mg/jour avec une réduction progressive jusqu'à 200 mg/jour sur une longue période. Doit être contrôlé complications possibles des yeux, puisque le médicament est toxique pour la rétine. Peut être utilisé pour contrôler les manifestations cutanées et articulaires difficiles à traiter. faibles doses corticostéroïdes (prednisolone 5-10 mg/jour).

Des doses élevées de corticostéroïdes et de médicaments immunosuppresseurs sont généralement prescrites à mesure que la maladie progresse et touche les reins et d'autres organes. En règle générale, lors d'une exacerbation du LED (crise lupique), la prednisolone orale est prescrite à une dose de 50 à 100 mg/jour ou une thérapie pulsée intraveineuse intermittente avec de la méthylprednisolone (500 à 1 000 mg). Lorsque l’effet est obtenu (généralement après quelques semaines), la dose de corticostéroïdes est progressivement réduite.

En cas de résistance aux glucorticoïdes et d'inefficacité des autres thérapies, du cyclophosphamide est prescrit, administration intraveineuse qui (en cures de 4 à 6 semaines ; jusqu'à 6 cures ou plus) est plus efficace et moins toxique qu'une administration orale quotidienne à long terme. En cas d'administration orale à long terme, il existe un risque possible de développer des complications infectieuses (herpès zoster), une infertilité (en particulier chez la femme), des tumeurs et une toxicité moins prononcée pour la vessie.

L'azathioprine est moins toxique que le cyclophosphamide, mais la monothérapie en cas de lésions rénales est moins efficace. Il est le plus souvent utilisé comme deuxième médicament en association avec la prednisolone, permettant de réduire la dose de cette dernière. Dans ces cas, la dose de corticostéroïdes ne doit pas être réduite en dessous de 12 à 15 mg/jour sans risque d’augmentation de l’activité de la maladie.

Sur le mécanisme d'action de la cyclosporine. Et plus de détails seront discutés dans la section « Polyarthrite rhumatoïde" Il convient également de noter que ces dernières années, une nouvelle forme galénique de cyclosporine, sandimmune-neoral, s'est révélée efficace dans le traitement du syndrome néphrotique.

Description

Matériel à l'étude Sérum sanguin

N° 997 Anticorps contre les IgM de classe cardiolipine

Dans le lupus érythémateux systémique (LED) et d'autres maladies rhumatismales systémiques, la réponse immunitaire est dirigée contre les antigènes nucléoprotéiques, c'est-à-dire complexes d'acides nucléiques et de protéines. Actuellement, environ 200 types d'anticorps dirigés contre les nucléoprotéines et les acides ribonucléiques, appelés anticorps antinucléaires, ont été décrits.

Le facteur antinucléaire sur la lignée cellulaire HEp-2 (voir description du test) permet de détecter 90 à 95 % de tous les anticorps antinucléaires, puisque cellules humaines contiennent tous les antigènes d'anticorps antinucléaires, y compris les antigènes structuraux, insolubles et conformationnels. Le facteur antinucléaire de la lignée cellulaire HEp-2 est présent dans le LED, d'autres maladies rhumatismales systémiques et de nombreuses maladies auto-immunes, ce qui en fait un test universel dans l'examen des patients atteints de pathologie auto-immune. L'identification du facteur antinucléaire est d'une grande importance dans le LED, car ses titres sont en corrélation avec la gravité de la maladie et diminuent avec un traitement efficace.

Les anticorps dirigés contre les nucléosomes sont l'un des premiers auto-anticorps formés dans l'organisme au cours du développement du LED. Les anticorps dirigés contre les nucléosomes, comme les anticorps dirigés contre l'ADNdb, peuvent jouer un rôle grand rôle dans la pathogenèse des lésions rénales dans la néphrite lupique. Des niveaux élevés d'anticorps antinucléosomiques sont caractéristiques exclusivement des patients atteints de LED actif accompagné de néphrite, et leur niveau est en corrélation positive avec les indicateurs d'activité de la maladie. Le niveau d'anticorps dirigés contre les nucléosomes augmente immédiatement avant une épidémie de LES, parallèlement au développement de la glomérulonéphrite.

Les anticorps anti-cardiolipine des classes IgG et IgM sont les principaux représentants de la famille des anticorps antiphospholipides. Outre les anticorps contre la bêta-2-glycoprotéine, les anticorps contre la cardiolipine sont inclus dans les critères de laboratoire du syndrome des antiphospholipides et, avec les anticorps contre l'ADN double brin et l'antigène Sm, dans les critères immunologiques du lupus érythémateux disséminé.

Littérature

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6. Shoenfeld Y., Cervera R, Gershvin ME Critères de diagnostic des maladies auto-immunes / Humana Press – 2008. 598 p.
7. Instructions pour le kit de réactifs.

Préparation

Il est préférable d'attendre 4 heures après le dernier repas, exigences obligatoires Non.

Indications pour l'utilisation

L'étude est indiquée pour le diagnostic et le suivi des affections suivantes :

• le lupus érythémateux disséminé;
• glomérulonéphrite lupique;
• lupus d'origine médicamenteuse;
• syndrome secondaire des antiphospholipides dans le lupus érythémateux systémique.

Interprétation des résultats

L'interprétation des résultats de la recherche contient des informations pour le médecin traitant et ne constitue pas un diagnostic. Les informations contenues dans cette section ne doivent pas être utilisées pour l’autodiagnostic ou l’auto-traitement. Le médecin pose un diagnostic précis en utilisant à la fois les résultats de cet examen¤ et information nécessaireà partir d'autres sources : antécédents médicaux, résultats d'autres examens, etc.

Le facteur antinucléaire, les anticorps antinucléosomes et les anticorps anticardiolipines des classes IgG et IgM jouent un rôle majeur dans le diagnostic et le suivi des patients atteints de LED. La surveillance des titres de facteurs antinucléaires, des anticorps anti-nucléosomes et des anticorps anti-ADNdb est recommandée tous les 3 mois.

Une étude complète des auto-anticorps liés aux critères immunologiques du lupus érythémateux systémique (ANA, anti-ADNdb et anticorps anti-cardiolipine), utilisés pour diagnostiquer cette maladie.

Synonymes russe

Diagnostic sérologique du LED ;

auto-anticorps dans le LED.

synonymes anglais

Tests sérologiques, S.L.E. ;

Autoanticorps, S.L.E. ;

Critères immunologiques, LED.

Quel biomatériau peut-on utiliser pour la recherche ?

Sang veineux.

Comment bien se préparer à la recherche ?

• Ne fumez pas pendant 30 minutes avant le test.

Informations générales sur l'étude

Lupus érythémateux systémique (LED) – maladie auto-immune, caractérisé par une variété de manifestations cliniques Et large éventail auto-anticorps. Le plus grand signification clinique avoir les types suivants anticorps :

• Le facteur antinucléaire (ANF, autre nom : anticorps antinucléaires, ANA) est un groupe hétérogène d'auto-anticorps dirigés contre des composants de ses propres noyaux. Les ANA sont retrouvés chez 98 % des patients atteints de LED. Tel haute sensibilité signifie que résultat négatif la recherche exclut le diagnostic de LED. Ces anticorps ne sont cependant pas spécifiques du LES : ils sont également détectés dans le sang de patients atteints d'autres maladies (autres maladies du tissu conjonctif, pancréatite auto-immune, cirrhose biliaire, quelques Néoplasmes malins). Il existe plusieurs façons de déterminer l'ANA dans le sang. Méthode réaction indirecte fluorescence (RNIF) utilisant des cellules épithéliales HEp-2 vous permet de déterminer le titre et le type de lueur. Les types de luminescence les plus typiques du LED sont les types de luminescence homogènes, périphériques (marginaux) et mouchetés (granulaires).
• Les anticorps anti-ADN double brin (anti-ADNdb) sont des auto-anticorps dirigés contre notre propre ADN double brin. Ils sont un type d’ANA. L'anti-ADNdb est présent chez environ 70 % des patients atteints de LED. Bien que la sensibilité des anti-ADNdb pour le LED soit inférieure à celle des ANA, leur spécificité atteint 100 %. Cette sensibilité élevée signifie qu'un résultat de test positif confirme le diagnostic de LED.
• Les anticorps antiphospholipides sont un groupe hétérogène d'auto-anticorps dirigés contre les phospholipides et leurs molécules associées. Ce groupe comprend les anticorps dirigés contre la cardiolipine, la bêta-2-glycoprotéine, l'annexine V, la phosphatidyl-prothrombine et autres. 5 à 70 % des patients atteints de LED possèdent des anticorps antiphospholipides. Le type d’anticorps antiphospholipides le plus couramment détecté est celui des anticorps anticardiolipines (ACA). Les AKA sont dirigés contre l'un des phospholipides de la membrane mitochondriale, appelé cardiolipine (on sait que les AKA ne sont pas dirigés contre le phospholipide lui-même, mais contre l'apolipoprotéine plasmatique associée à la cardiolipine).

Le diagnostic du LED est assez difficile et complexe. Les anomalies immunologiques sont un trait caractéristique de cette maladie et les tests de laboratoire en font partie. algorithme de diagnostic. Pour éviter les erreurs, le médecin (et le patient) doivent comprendre quel est le rôle de tests de laboratoire dans le diagnostic de cette maladie et comment interpréter correctement leurs résultats.

Auparavant, les critères diagnostiques du LED incluaient les cellules LE et les tests sérologiques faussement positifs persistants pour la syphilis. Avec le développement des méthodes de diagnostic en laboratoire et une compréhension plus complète pathogenèse du LED les critères diagnostiques ont changé. Actuellement, les critères de classification de 1997 de l'American College of Rheumatology (ACR) sont le plus souvent utilisés pour diagnostiquer le LED. Ils comprennent : Signes cliniques, paramètres sanguins et troubles immunologiques (11 critères au total). Si un patient présente 4 critères ACR ou plus, le diagnostic de LED est considéré comme probable. Les critères immunologiques de l'ACR comprennent :

• Présence d'anticorps contre l'ADN double brin (anti-ADNdb), d'anticorps contre l'antigène de Smith (anti-Sm) ou anticorps antiphospholipides (y compris les anticorps anticardiolipines IgG et IgM, anticoagulant lupique Et réactions faussement positives pour la syphilis) – 1 point. On peut voir que dans la classification ACR, les trois types d'auto-anticorps sont combinés en un seul critère.
• Présence d'anticorps antinucléaires ANA – 1 point. Un titre plus élevé (plus de 1:160) est plus spécifique du LED.

En 2012, ces critères ont été révisés pour refléter les nouvelles compréhensions du LED, ce qui a abouti aux critères de classification SLICC SLE. Interprétation troubles immunologiques dans le LED a subi des changements significatifs. Les critères immunologiques du SLICC comprennent :

• La présence d’ANA dans un titre dépassant la valeur de référence du laboratoire – 1 point ;
• La présence d'anti-ADNdb dans un titre dépassant la valeur de référence du laboratoire, ou lors de l'utilisation d'ELISA - deux fois la valeur du laboratoire - 1 point ;
• Présence d'anti-Sm – 1 point ;
• La présence d'anticorps antiphospholipides, y compris les anticorps anticardiolipines IgG, IgM et IgA à titres élevés et moyens, anticoagulant lupique, résultat faussement positif du test anticardiolipine/microréaction de précipitation pour la syphilis, anticorps anti-glycoprotéine bêta-2 IgG, IgM et IgA) – 1 point ;
• Niveau de complément diminué (C3, C4 ou C50) – 1 point ;
• Un résultat positif au test de Coombs direct (en l’absence d’anémie hémolytique) – 1 point.

Si un patient présente 4 critères SLICC ou plus (avec un critère clinique et un critère immunologique requis), le diagnostic de LED est considéré comme probable. On constate que le critère ANA est resté inchangé, tandis que les anticorps anti-ADNdb, anti-Sm et antiphospholipides ont été divisés en critères indépendants. En plus:

(2) les anticorps anticardiolipine à faible titre ne sont plus pris en compte ;

(3) ajouté Classe IgA des anticorps anticardiolipine et des anticorps dirigés contre la bêta-2-glycoprotéine ;

(4) des critères supplémentaires ont été ajoutés (diminution des taux de complément, anticorps contre la bêta-2-glycoprotéine, etc.).

Cette étude complète a inclus les auto-anticorps les plus courants dans le LED (anticorps ANA, anti-ADNdb et anticardiolipine). Bien que ces trois types d'anticorps restent critères importants, de nouveaux critères émergent qui pourraient être utiles pour diagnostiquer le LED. Par conséquent, dans certains cas, cela Analyse complète complété par d’autres tests de laboratoire. Il convient de souligner à nouveau que, bien que les tests de laboratoire jouent un rôle important dans le diagnostic du LED, ils ne doivent être évalués qu'en conjonction avec des données cliniques.

A quoi sert la recherche ?

• Pour le diagnostic du lupus érythémateux systémique.

Quand est prévue l’étude ?

• En présence de symptômes de lupus érythémateux systémique : fièvre, lésions cutanées (érythème papillon, éruptions discoïdes et autres sur la peau du visage, des avant-bras, de la poitrine), arthralgie/arthrite, pneumonite, péricardite, épilepsie, lésions rénales ;
• en présence de changements typiques du LED dans analyse clinique sang : anémie hémolytique, leucopénie ou lymphopénie, thrombocytopénie.

Que signifient les résultats ?

Valeurs de référence

1. Facteur antinucléaire

Résultat : négatif.

2. Anticorps contre l'ADN double brin (anti-ADNdb), IgG : 0 - 25 UI/ml.

3. Anticorps contre la cardiolipine, IgG : 0 - 10 U/ml.

Anticorps contre la cardiolipine, IgM : 0 - 10 U/ml.

Critères immunologiques du LED (ACR, 1997) :

• anticorps anti-ADNdb, anti-Sm ou antiphospholipides (y compris les anticorps anticardiolipine IgG et IgM, l'anticoagulant lupique et les réactions faussement positives pour la syphilis) ;

Critères immunologiques du LED (SLICC, 2012) :

• un résultat anti-ADNdb positif supérieur à deux fois la valeur du laboratoire de référence (selon la méthode ELISA) ;
• anticorps anticardiolipine IgG, IgM ou IgA à titre élevé ou moyen ;
• autres critères indépendants : anti-Sm, diminution des taux de C3, C4 ou C50, résultat positif au test de Coombs direct.

Qu'est-ce qui peut influencer le résultat ?

• Temps écoulé depuis le début de la maladie ;
• activité de la maladie.

Notes IMPORTANTES

• Le résultat de l'analyse doit être évalué avec les données d'études complémentaires en laboratoire et instrumentales ;
• pour obtenir résultat exact Vous devez suivre les directives de préparation au test.

Qui commande l’étude ?

Médecin pratique générale, thérapeute, rhumatologue.

Littérature

• Petri Met al. Dérivation et validation des critères de classification des cliniques collaboratrices internationales du lupus systémique pour le lupus érythémateux systémique. Arthrite rhumatismale. Août 2012;64(8):2677-86. est ce que je : 10.1002/art.34473.
• Gibson K, Goodemote P, enquêtes cliniques de Johnson S. FPIN : tests d'anticorps pour le lupus érythémateux disséminé. Je suis médecin de famille. 15 décembre 2011;84(12):1407-9.
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Recherche en laboratoire

La thrombocytopénie est généralement détectée chez les patients atteints de SAPL. Très rarement, une thrombocytopénie auto-immune se développe associée à la synthèse d'AT en plaquettes.
. Une augmentation de la CRP est inhabituelle ; noté dans la plupart des cas s'il y a infection concomitante. Augmentation modérée Concentrations de SRP (<10 мг/мл) ассоциируется с атеросклеротическим поражением сосудов.

Analyse d'urine générale
On détecte une protéinurie, une hématurie, une leucocyturie dont la gravité dépend de la variante clinique et morphologique de la néphrite lupique.

Etudes biochimiques
Les modifications des paramètres biochimiques ne sont pas spécifiques et dépendent des dommages prédominants aux organes internes au cours des différentes périodes de la maladie. Etudes immunologiques
. Le facteur antinucléaire (ANF) est une population hétérogène d'auto-anticorps qui réagissent avec divers composants du noyau cellulaire. L'ANF ​​est détecté chez 95 % des patients atteints de LED (généralement à titre élevé) ; son absence dans la grande majorité des cas plaide contre le diagnostic de LED.

AT antinucléaire. Les AT de l'ADN double brin (natif) (anti-ADN) sont relativement spécifiques du LED ; détecté chez 50 à 90 % des patients ♦ AT aux histones, plus typique du lupus d'origine médicamenteuse. Les antigènes AT à 5m (anti-Sm) sont hautement spécifiques du LED, mais ils ne sont détectés que chez 10 à 30 % des patients ; L'AT aux petites ribonucléoprotéines nucléaires est plus souvent détectée chez les patients présentant des manifestations de maladies mixtes du tissu conjonctif. ♦ L'AT à l'antigène Ro/SS-A (anti-Ro/SSA) est associée à une lymphopénie, une thrombocytopénie, une photodermatite, une fibrose pulmonaire, un syndrome de Gougerot-Sjögren. L'antigène AT vers La/SS-B (anti-La/SSB) est souvent trouvé avec l'anti-Ro.

L'APL, la réaction de Wasserman faussement positive, l'anticoagulant lupique et l'AT à la cardiolipine sont des marqueurs de laboratoire du SAPL.

Autres anomalies de laboratoire
Chez de nombreux patients, des cellules dites lupiques sont détectées - cellules LE (ou lupus érythémateux) (leucocytes qui ont du matériel nucléaire phagocyté), complexes immuns circulants, RF, mais la signification clinique de ces anomalies de laboratoire est faible. Chez les patients atteints de néphrite lupique, on observe une diminution de l'activité hémolytique totale du complément (CH50) et de ses composants individuels (C3 et C4), qui est en corrélation avec l'activité de la néphrite (en particulier le composant C3).

Diagnostique

Critères de l'American Rheumatology Association

3. Photosensibilité : éruption cutanée résultant d’une réaction inhabituelle à la lumière du soleil.
4. Ulcères buccaux : ulcération de la cavité buccale ou du nasopharynx ; généralement indolore.

5. Arthrite : arthrite non érosive affectant 2 articulations périphériques ou plus, se manifestant par une sensibilité, un gonflement et un épanchement.
6. Sérosite : pleurésie (douleur pleurale, ou frottement pleural, ou présence d'un épanchement pleural) ou péricardite (confirmée par échocardiographie ou auscultation d'un frottement péricardique).

7. Lésions rénales : protéinurie persistante > 0,5 g/jour ou cylindre (érythrocytes, hémoglobine, granulaire ou mixte).
8. Dommages au système nerveux central : convulsions ou psychose (en l'absence de prise de médicaments ou de troubles métaboliques).

9. Troubles hématologiques : anémie hémolytique avec réticulocytose ou leucopénie<4,0х109/л (зарегистрированная 2 и более раза), или тромбоцитопения <100х109/л (в отсутствие приёма ЛС).

10. Troubles immunologiques ♦ anti-ADN ou ♦ anti-Sm ou ♦ aPL : -augmentation du taux d'IgG ou d'IgM (AT à la cardiolipine) ; - test positif à l'anticoagulant lupique selon les méthodes standards ; - réaction de Wasserman faussement positive depuis au moins 6 mois avec une absence confirmée de syphilis par le test d'immobilisation de Treponema pallidum et le test d'adsorption fluorescente de l'AT tréponémique.
11. ANF : augmentation des titres d'ANF (en l'absence de prise de médicaments provoquant un syndrome de type lupique). Le diagnostic de LED est posé lorsque 4 ou plus des 11 critères énumérés ci-dessus sont retrouvés.

Critères diagnostiques du SAPL

II. Critères de laboratoire
1. AT à la cardiolipine (IgG et/ou IgM) dans le sang à des titres moyens ou élevés dans 2 études ou plus avec un intervalle d'au moins 6 semaines.
2. Anticoagulant lupique plasmatique dans 2 études ou plus espacées d'au moins 6 semaines, déterminé comme suit :
. prolongation du temps de coagulation plasmatique dans les tests de coagulation phospholipidiques dépendants ;
. manque de correction pour l'allongement du temps de coagulation des tests de dépistage dans les tests de mélange avec le plasma d'un donneur ;
. raccourcissement ou correction ou prolongation du temps de coagulation des tests de dépistage lors de l'ajout de phospholipides ;
. exclusion des autres coagulopathies. Un SAPL spécifique est diagnostiqué sur la base de la présence d'un critère clinique et d'un critère biologique.

Si un LED est suspecté, les études suivantes doivent être réalisées :
. test sanguin général avec détermination de l'ESR et comptage du contenu en leucocytes (avec formule leucocytaire) et en plaquettes. test sanguin immunologique avec détermination de l'ANF. analyse d'urine générale. radiographie pulmonaire
. ECG, échocardiographie.